糖基化修饰是真核生物蛋白中常见的一种翻译后修饰类型。该过程发生在内质网，由糖基转移酶催化，糖分子通过N-糖苷键与新合成的蛋白质上的天冬酰胺残基连接。随后，这些修饰将在内质网和高尔基体内经过一系列后续加工。糖基化的修饰通常发生在Asn-X-Thr/Ser(X≠Pro)序列中的天冬氨酸残基上。

所有真核生物的N-聚糖均包含一个共同的核心序列：Manα1-3[Manα1-6]Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAcβ1-N-Asn-X-Ser/Thr，主要分为三种类型：(1) 高甘露糖型：仅延伸Man残基；(2) 复杂型：由GlcNAc启动延伸；(3) 混合型：包括Manα1-6臂和Manα1-3臂。值得注意的是，单克隆抗体（单抗）在N297位点的N-糖类型与其Fc效应功能有着密切关联。例如，去除或降低岩藻糖和N-乙酰葡萄糖胺，会增强单抗Fc段与FcγRⅢa (CD16a) 的结合力，进而提升抗体依赖的细胞介导细胞毒性（ADCC）效应。此外，增加末端半乳糖量也会增强单抗Fc段与补体C1q的结合，促进补体依赖的细胞毒性（CDC）效应。

在复杂蛋白中，N-糖的唾液酸化程度较高，若缺失唾液酸，N-糖链上的半乳糖或N-乙酰葡萄糖胺及甘露糖将暴露出来。半乳糖可能与肝细胞上的无唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）结合，而N-乙酰葡萄糖胺与甘露糖也可通过与甘露糖受体结合，促进糖蛋白的内吞及降解，从而缩短糖蛋白的半衰期。

根据资料显示，商业化的抗体通常包含多种糖型，且不同批次的抗体糖型种类和比例存在差异，这将导致药效的波动。因此，制备糖型均一性高的抗体，以确保各批次产品性能的稳定，具有重要的意义。

尊龙凯时指出，N-糖检测的法规要求明确，N-糖基化修饰对抗体的生物学功能、半衰期、免疫原性、蛋白溶解性、热稳定性、蛋白酶抵抗性及聚集性有显著影响，因此它是抗体生产中批间一致性的重要指标。制药企业需将N-糖检测纳入质量研究标准及工艺开发放行标准，并在细胞克隆筛选、工艺设计及确认中，关注N-糖修饰水平的变化。

国际会议协调会（ICH-Q6B）及各国药典与监管机构均已对N-糖基化的定量检测制定了要求。《中国药典》2025年版中详细描述了“9405糖蛋白的糖基化分析指导原则”与“3130N-糖谱测定法”的检测与分析方法，以确保生物制药产品的质量与稳定性。

在实验过程中，操作时间不超过1小时，避免使用冻干等耗时步骤，也不含氰基硼氢化钠等有害试剂，确保荧光信号高效，准确性与一致性得到保障。PNGaseF酶切效率的最大化使得糖型数据得到了一致性的验证，展现出良好的批次稳定性与耐用性，获得客户的积极评估。