产品及特点

本产品是根据探针法荧光定量PCR原理研发的检测试剂盒，具备以下几个突出特点：

即开即用

用户仅需提供样品DNA模板，便可立即进行实验。

高灵敏度

引物等成分经过优化处理，确保了试剂盒的高灵敏度。

阳性对照

产品中提供阳性对照，便于有效区分假阴性样品，提升检测的可靠性。

高特异性

引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，避免与其他生物样本DNA发生交叉反应，保证检测结果的准确性。

定性与定量检测

本试剂盒不仅适用于定性检测，也支持定量检测，定量范围至少达到5个数量级。

反应次数

本产品足以支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

科研专用

该产品仅限于科研用途，适用于学术研究及相关领域。

使用方法

以下为具体使用步骤：

一、DNA提取

使用自选方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒与市场大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

(请在独立区域进行，防止交叉污染)

1. 标记6个离心管，分别编号为7，6，5，4，3，2。
2. 使用带芯枪头，向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，制得1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品，置冰待用。
4. 依此类推，在后续管中进行稀释，直到得到6个不同稀释度的标准曲线样品。

三、试剂配制

根据待检样品数量，准备相应的qPCR管，向各管中添加必要的试剂成分。

四、添加模板

在qPCR管中添加2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，充分离心后立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置于PCR扩增仪器相应位置，按设定程序进行扩增。

六、结果分析

如果制作标准曲线，使用阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值为纵轴绘制曲线。若未制作标准曲线，根据Ct值判定结果:

• 阳性对照：Ct值<30，呈现典型S型曲线。
• 阴性对照：Ct值38或无Ct值。
• 样本结果：Ct值<35为阳性，Ct值38或无Ct值为阴性，35-38范围需复检。

运输及保存

产品需低温运输，存放于-20℃，保存期限为一年。阳性对照需单独保存，确保不污染其他试剂。

选择尊龙凯时的检测试剂盒，为您的科研提供安全保障，确保结果的精准可靠。