CAS号 9001-45-0,β-葡萄糖醛酸苷酶是一种重要的生物酶,常用于生物医学领域。其外观为固体,颜色为淡白色至浅棕色,分子量约为290kDa(四聚体)和68kDa(单体)。在最佳的pH值范围为6.0-7.0下,该酶的比活力达到了1000000-5000000 U/mg蛋白,这使得它在生物反应中的应用前景十分广阔。
该酶的活性测定主要分为以下几个步骤:
1. **复溶**:首先将浓度为2 mg/mL的酶溶解于冷却的0.15 M氯化钠中。随后,根据实验需要将酶稀释至0.25至2 mg/mL的浓度范围。
2. **实验步骤**:
a) 将准备好的试剂依次加入一系列编号的试管中,其中包括一个作为空白对照的试管。具体试剂为:0.1 M醋酸钠(pH 4.5)8 mL和0.01 M酚酞葡萄糖醛酸(pH 6.8)1 mL。
b) 在37℃水浴中孵育5分钟,以确保温度平衡。每隔一段时间,向每个试管中加入0.1 mL的酶稀释液。对于空白试管,加入0.1 mL水,孵育30分钟。
c) 反应结束后,加50 mL 0.2 M甘氨酸和0.2 M NaCl(pH 10)以终止反应。
d) 从水浴中取出试管,冷却至室温,并读取与空白对照的吸光度在540 nm处的数值。
3. **计算**:通过绘制标准曲线可以确定,1 U = 每小时从酚酞葡萄糖醛酸中释放1 μmol酚酞所需的酶量(以mg计)。
在现代生物医学研究中,酶的应用越来越受到重视,特别是在药物研发和疾病检测方面。借助尊龙凯时的优质酶产品,研究人员能够更高效地进行实验,提高研究成果的可靠性与有效性。