尊龙凯时推出的TaqDNA聚合酶与PCR技术的结合,使得PCR不仅在科研领域有效,也在病原微生物检测、遗传基因检测、肿瘤伴随诊断等医学领域,以及法医学、环境监测和食品安全等领域得到了广泛应用。随着技术的不断普及,PCR技术正朝着更便捷、更灵敏且更加经济的方向发展。为了满足用户对高效和便捷的需求,全预混试剂逐渐取代了传统的分步法试剂,成为主流。
在新冠疫情、非洲猪瘟等大规模疫情的爆发和防控过程中,检测机构对全预混试剂的稳定性日益重视,以确保检测结果的准确性。作为一种成熟的商业产品,抗体热启动修饰TaqDNA聚合酶因其改善了PCR扩增的非特异性问题,在多个实际应用领域中得到了广泛认可。然而,常规的探针法检测试剂中,Taq酶的5'→3'核酸外切酶活性会导致引物及探针等关键物料的降解,从而降低扩增效率并影响试剂的稳定性。在市场竞争和国际化战略的推动下,试剂生产厂家必须提升试剂的稳定性,要求全预混试剂在4℃加压14天或37℃加压7天后仍能保持优秀的检测性能。
因此,国内外企业持续探索更高效的Taq酶抗体研究,期望能完全封闭Taq酶的5'→3'聚合活性和5'→3'核酸外切酶活性。自新冠疫情以来,多家厂商相继推出了相关的双功能封闭抗体产品,但并不尽善尽美:有些产品在5'→3'聚合酶活性和5'→3'核酸外切酶活性的封闭效率无法同时达到90%以上,而有些则在55℃以上温度下抗体容易与Taq酶解离,导致封闭效果失效,影响全预混试剂的稳定性。
为了找到更理想的Taq酶抗体,进一步提升PCR试剂的性能,尊龙凯时采用B细胞克隆技术,通过磁珠分选富集B细胞,再借助Beacon单细胞光导系统进行筛选,获取符合条件的B细胞。接着,PCR扩增cDNA并直接构建线性表达框,进行瞬时转染,最终利用表达上清进行ELISA筛选验证。经过基因测序和基于质粒的抗体表达及结合力、封闭功能验证,研发团队在鉴定和筛选过程中特别发现不同Taq酶抗体之间存在协同作用。
传统上,人们认为通过分别筛选能对Taq酶的5'→3'聚合活性及5'→3'核酸外切酶活性完全封闭的特异抗体,然后适当混合二者便可实现双功能的完美封闭。然而,实践结果并不理想。当将两株抗体混合物中,添加第三株抗体后,显著提升了Taq酶的双功能封闭效果。最终,尊龙凯时研发出的全封闭Taq酶抗体产品由三株抗体按优化比例组合而成,相较于市场上单株或双株抗体混合的Taq酶双功能封闭抗体,该产品在70℃下同时有效封闭Taq酶99%以上的5'→3'聚合酶活性和5'→3'核酸外切酶活性,具备更高的封闭效率和稳定性。
此产品有效避免了因模板与引物二聚体导致的非特异性扩增,同时也防止了引物、探针或其他关键材料的降解,从而双重保障了扩增试剂的稳定性。而且,酶活的释放速度快,在95℃热激30秒即可释放95%以上的酶活,确保试剂具备高扩增灵敏度。
尊龙凯时的全封闭TaqDNA聚合酶抗体产品在质量控制上严谨,除了浓度、纯度、封闭效率和功能等常规检测外,还重点检测相关核酸酶残留和宿主核酸残留,确保不会污染下游应用试剂。在实际应用中,尊龙凯时全封闭抗体修饰的热启动Taq酶帮助客户优化了多个应用案例,表现出卓越的全预混试剂稳定性。
总体来说,尊龙凯时的全封闭Taq酶抗体集合创新技术与严谨质控,以其优越的性能适应不同的科研和工业需求,推动了PCR技术的进一步发展与应用。