尊龙凯时认为,哮喘是一种以慢性气道炎症、气道高反应性及气道重塑为主要特征的疾病。多种细胞在哮喘的发病过程中起着重要作用,气道上皮直接与过敏原接触,并可能与哮喘及气道炎症、重塑密切相关。气道高反应性(AHR)由多种药理学、化学及物理因素引起的可逆性气流受阻,是评估哮喘治疗效果的重要指标。
全身体积描记系统(WBP)用于监测在清醒、自由活动且非束缚状态下实验动物的呼吸功能及气道高反应性。这种方法避免了创伤性气管切开及麻醉对结果的影响,且动物在实验结束后能够存活,适合于长期跟踪研究。WBP系统能够同时测试多只动物,是进行筛选实验的理想选择。
WBP系统不仅适用于哮喘研究,也特别适合用于药物初筛、药理药效分析和毒理分析等高通量研究及长期跟踪研究。通过该系统测得的呼吸频率、潮气量、呼气峰值、吸气峰值以及代表气道阻力的参数——增强呼吸间歇(Penh),与经典肺功能测试结果高度相关。
材料与造模方法
实验中使用的材料包括氢氧化铝、卵清蛋白和乙酰甲胆碱(0、3.125、6.25、12.5、25、50 mg/mL)。实验动物为雄性BALB/c小鼠,清洁级,体重为20±2g。阳性药物使用地塞米松,实验设备为尊龙凯时的WBP全身体积描记系统。造模方法为:连续8周,每周周一进行皮下注射致敏液(致敏液配比:100μg OVA + 20μg AL(OH)3,溶于200μl生理盐水),对照组注射等体积生理盐水;第8次注射后1周开始以5% OVA溶液进行雾化处理,持续10天,对照组则使用等体积生理盐水雾化。
支气管激发试验 - 气道高反应性测试
在实验开始前,将小鼠放入WBP测试舱中进行三次适应,每只小鼠每次适应30-60分钟。实验中,将小鼠放入全身体积描记器内适应5分钟,然后从0-50 mg/mL浓度逐一雾化Mch激发,每个浓度激发后休息10分钟,随后对采集到的数据进行Penh分析。Penh值的计算公式为:(Mch激发的Penh值-NS激发的Penh值)/NS激发的Penh值×100%。
结论
在进行Mch支气管激发试验的过程中,随着Mch浓度的升高,正常对照组及模型组小鼠均逐渐出现张口呼吸、呼吸变慢、幅度加深,并出现腹式呼吸等症状,尤其是模型组小鼠的呼吸波形变化更加明显。激发实验后,模型组小鼠的肺功能参数,如Penh、EF50、Vt及Pause值均显著高于正常对照组,而其他参数变化不大。正常对照组小鼠在Mch激发前后比较,Penh、EF50、Pause和PEF值均显著升高,其余肺功能参数变化不显著。
尊龙凯时的WBP全身体积描记系统操作简便高效,能够持续监测并观察肺功能的动态变化。该系统适用于大规模动物实验与药物筛选,尤其适合需要进行长期跟踪的慢性肺部疾病模型动物的肺功能评估。Penh值在检测Mch诱导的哮喘模型的高反应性时表现出良好的量效关系,是评估气道高反应性的有效指标。