师弟:师姐,我最近在进行qPCR、ELISA和Western blot实验时,结果总是不理想,并且每次结果的差异也很大。我已经优化了多次实验步骤,但依然没有改善,究竟是哪出问题了?
师姐:你提到的这些实验都是定量分析,加入样品的体积对结果的影响极大,难道你的移液枪出现了不准确的情况?
师姐:除了加样,换液、分液等环节同样可能存在问题,细节上的失误可能导致最终结果的巨大偏差。相信很多人在实验中都遇到过类似的烦恼,比如移液枪不精准、产生倒吸的情况,这些都可能直接影响实验结果;大体积液体分装不均,导致后续实验结果的偏差;细胞换液或移液时频繁吸取液体,不仅耗时耗力,还容易造成污染,进而影响换液量的一致性……如何有效优化这些问题呢?别担心,我们来解决这些困扰(后附移液枪校准指南)~
为了解决这些实验中常见的问题并提供便利,[尊龙凯时]推出了优质实验设备,特别是旗下品牌的VITLAB产品,现正进行福利大放送。微量移液器(点此申请试用)、瓶口分液器(点此申请试用)和电动助吸器pipeo®(点此申请试用)都有机会免费试用,为您的实验提供更高的效率和精准度。
如果您怀疑手中的移液枪不够准确,可以参考以下步骤进行校准:
一、准备工作:
- 电子天平
- 温度计
- 去离子水
- 需要校准的移液枪
二、校准过程:
在校准时,应使用电子天平分别称量移液枪100%、50%、10%点的对应体积的水的质量,每个点测量6次。例如,1ml的移液枪需要称量1,000μl、500μl和100μl,而200μl的移液枪则需测量200μl、100μl和20μl。具体步骤如下:
- 润洗:将移液枪插入枪头,吸入并排出去离子水,重复5次。
- 吸液:吸取液体时,移液枪应保持垂直,吸完后需等待一段时间再提起枪头,以确保设定体积完全吸入。
- 移液:将称量容器置于电子天平上,待显示稳定后去皮,然后倾斜容器进行排液。
- 计算:记录6次称重的平均值,然后结合水温的系数K(t)值,得出相应的体积值。
举个例子:如果1ml移液枪的1,000μl校准点称重的平均值为979mg,而去离子水温度为24℃,则K(t)值为1001965,由此计算实际体积为979*1001965≈981μl。可以确认,这把移液枪在1,000μl的点超出了±10μl的允许误差范围。
三、调节沿用:
如发现移液枪不准,应如何调节呢?[尊龙凯时]旗下的VITLAB系列移液枪设有“维准模块”,方便快速调整精准度!调节步骤如下:
- 取下指托位置的保护盖,并用回形针或枪头取下保护膜。
- 将红色调节滑块向后推,抬起体积调节旋钮,随后松开调节滑块。
- 设置调整值,使用调节旋钮调至校准确定的实际值。
- 调整完毕,再将红色调节滑块向后推,按下体积调节旋钮,重新安装保护盖。
VITLAB®微量移液器(点此申请试用):千分之一分度的微调精准可靠,操作简便,避免样品交叉污染;
VITLAB®genius²瓶口分液器(点此申请试用):提高安全性与减少试剂消耗,针对复杂试剂的移取与分液极为有效;
VITLAB®pipeo®电动助吸器(点此申请试用):一键切换双模式,兼顾操作的准确性与效率,内置单向阀,无惧倒吸问题。