间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒是一款由尊龙凯时团队精心研发和优化的产品,旨在提升间充质干细胞向成脂细胞的分化能力。此试剂盒仅限于科研用途,严禁用于诊断、治疗、临床或家庭等其他用途。
产品规格与价格
成脂诱导液货号:YJ-MSCYD-004
价格:12800
规格:100ml / 200ml
产品组成与保存条件
本产品包含以下成分及其保存建议:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5mL/10mL,保存于-20℃,有效期1年
- 诱导分化添加剂Ⅱ:1mL/2mL,保存于-20℃,有效期1年
- 优质胎牛血清:10mL/20mL,保存于-20℃,有效期1年
- 细胞基础培养基:85mL/170mL,保存于4℃,有效期1年
- 油红O染色液:5mL/10mL,保存于4℃避光,有效期1年
注意事项:为了确保产品的有效性,请避免反复冻融;配制好的诱导培养基需在2-8℃保存,有效期为2周,建议根据实验用量合理配制。
使用说明
成脂诱导分化完全培养基的配制
在室温下融化各因子及血清后,瞬时离心集中于离心管底部(注意:若因子或血清中出现沉淀物属正常现象,无需过滤以避免成分流失)。
在无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,建议每次配制50mL,以下是配制比例:
试剂成分 | 配制比例 | 50mL配制体系 |
---|---|---|
诱导分化添加剂Ⅰ | 5% | 25mL |
诱导分化添加剂Ⅱ | 1% | 50uL |
优质胎牛血清 | 10% | 5mL |
细胞基础培养基 | 85% | 425mL |
成脂诱导分化实验步骤
建议选择第3~5代、纯度达到90%以上、状态良好的间充质干细胞。离心收集后,用含10% FBS的完全培养基调整细胞密度,并均匀铺于培养瓶/板中,放置于37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。
待细胞汇合度达到80%~100%时,进行诱导分化。小心吸弃细胞培养上清,沿孔壁缓慢加入提前配制好的诱导分化完全培养基,并放入37℃的细胞培养箱中孵育。每2~3天更换新鲜的诱导分化培养基,注意观察培养基的颜色变化,适时缩短换液周期。
经过3周的诱导后,便可以进行油红O染色鉴定。
油红染色分析
在诱导分化结束后,小心吸弃细胞培养上清,用1×PBS清洗1~2次,然后加入适量细胞固定液,室温下固定30分钟。
配制油红O工作液:按3:2的比例将油红O贮存液与蒸馏水混合均匀,并过滤收集滤液。染色时,沿孔壁缓慢加入油红O工作液,室温下染色30分钟。甩去染色液后,用PBS清洗以去除浮色,最终在显微镜下观察细胞内的油滴呈红色的效果。
在使用尊龙凯时的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒时,务必遵循上述步骤,以确保实验的准确性与有效性。